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技術(shù)文章

ELISA試劑盒冷凍后該如何正確處理?

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  ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的ELISA試劑盒,其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷客觀等因素,適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標(biāo)本的檢測,可以做定性試驗也可以做定量分析。
 
  ELISA試劑盒完整的ELISA試劑盒主要包含:
 
  1、酶的底物。
 
  2、已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)。
 
  3、酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)。
 
  4、結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液。
 
  5、洗滌液。
 
  6、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中)。
 
  7、酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的較終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
 
  那么被冷凍后的ELISA試劑盒質(zhì)量會受損嗎
 
  為其保存后可以使用,但不能反復(fù)凍融,如果您在一周之內(nèi)做實驗,可以2-8℃保存;如果您在一周至一個月之內(nèi)做實驗,可以-20℃保存;如果您在一個月以上做實驗,可以-80℃保存。但是值得注意的是,凍融一次比2-8℃保存損失更大,主要是因為蛋白的降解,凍融一次蛋白都有降解。
 
  在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫4℃等。
 
  室溫溫育時平置于操縱臺上即可。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在劃定的范圍內(nèi),尺度室溫溫度是指20~25℃,但詳細(xì)操縱時可根據(jù)仿單的要求控制溫育.
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